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革蘭氏染色液使用注意事項以及保存方法?

文章出處:本站 人氣:3742 發(fā)表時間:2019-11-09 15:22:50

革蘭氏染色液使用注意事項以及保存方法:

用途:革蘭氏染色液用于分子生物學(xué)中的培養(yǎng)

原理:蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

用法:稱取本品65.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時,加入過濾除菌的氯霉素50mg,混勻,傾入無菌平皿。

【注意事項】:由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,現(xiàn)在均改制成粉末。

培養(yǎng)基有天然、人工兩種革蘭氏染色液般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2~7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。

革蘭氏染色液的保存

1)干粉,買了后定要保存在4度。有人保存在-20度我認(rèn)為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。

2)配好的無血清培養(yǎng)基定保存在4度,保存不要超過3個月。用時根據(jù)提示要加入谷胺酰胺。

3)加入血清的培養(yǎng)基,好保存在4度不要超過1個月,從時間太長,活性下降。當(dāng)然稍微長點也不定出問題。但是根據(jù)細(xì)胞而定;如果原代培養(yǎng),好新鮮,如果是腫瘤細(xì)胞,或僅維持傳代就不太要緊。但是原則是越新越好。

以上就是小編為您整理的革蘭氏染色液使用注意事項以及保存方法的資料,希望可以幫助到您。

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