巴氏染色液染色的注意事項(xiàng)
(1)細(xì)胞核著色過淺:
1)鹽酸分化時(shí)間過長(zhǎng)或蘇木素染液時(shí)間過長(zhǎng)。需要縮短分化時(shí)間或延長(zhǎng)堿化時(shí)間;每天加入少量新鮮蘇木素染液或重新準(zhǔn)備蘇木素液。
2)固定前制片干燥。因此,巴氏染色的制片必須嚴(yán)格遵守濕固定的原則。
自來水的PH值偏酸。用堿溶液。
(2)細(xì)胞核著色過深:
1)鹽酸溶液濃度不夠。適當(dāng)加入幾滴鹽酸,增加濃度。
2)用95%以上濃度的酒精固定制片后,染色過深。用95%的酒精固定。
細(xì)胞漿著色不好。
如果整片內(nèi)胞漿都被淡染,則需延長(zhǎng)染色時(shí)間或更換新液。
(2)如果細(xì)胞漿不分色,則為淺紅色。片劑在固定前干燥或片劑受到大量球菌樣細(xì)菌的影響。這種情況可適當(dāng)增加染色時(shí)間,部分糾正不分色情況。
(3)細(xì)胞漿染成灰色或紫色,是因?yàn)樘K木素染色時(shí)間過長(zhǎng)或鹽酸分化不良。褪色后褪色后可以糾正。
(4)由于標(biāo)本的不同,相同配方的EA染液產(chǎn)生藍(lán)色、綠色和紅色,不同的標(biāo)本應(yīng)使用不同的EA染液。一般認(rèn)為EA36和EA50用于婦科標(biāo)本,而EA65或改良EA用于非婦科標(biāo)本。
(5)胞漿不分色的另一個(gè)重要原因是EA染液的PH值不當(dāng)。如果染色為紅色,可以加入少量磷鎢酸溶液進(jìn)行校正;如果染色為藍(lán)色或綠色,可以加入少量飽和碳酸鋰溶液進(jìn)行校正。對(duì)于改進(jìn)EA染液,每100ml加入2ml冰醋酸后染色效果更好;染液使用時(shí)間更長(zhǎng)。