淺析抗酸染色液
分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)帶有很多的脂類(lèi),包圍著在肽聚糖的外邊,因此分枝桿菌般不容易上色,要?dú)v經(jīng)加溫和增加染色劑時(shí)間來(lái)促進(jìn)其上色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染劑融合后,就沒(méi)辦法被酸堿性脫色劑脫色,故稱(chēng)抗酸染色。
齊-尼氏抗酸染色法是在加溫標(biāo)準(zhǔn)下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅堅(jiān)固融合成復(fù)合物,用硫酸酒精解決都不脫色。當(dāng)加上偏堿美蘭復(fù)染后,分枝桿菌依然為鮮紅色,而別的病菌及背景圖中的化學(xué)物質(zhì)為深藍(lán)色。
抗酸染色液般流程:
1)初染 用裝片夾夾緊抗酸染色標(biāo)本采集,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火苗高空緩緩加溫,切忌燒開(kāi),出現(xiàn)蒸氣即臨時(shí)離去,若染液揮發(fā)降低,應(yīng)加上染液,以防干枯,加溫3-5分鐘,待標(biāo)本采集制冷后自來(lái)水清洗。
2)脫色 3%硫酸酒精脫色30秒~1分鐘;自來(lái)水清洗。
3)復(fù)染 用偏堿美蘭水溶液復(fù)染1分鐘,手洗,用吸水紙吸走后用食油鏡觀(guān)查。
抗酸染色液的染液配置:1、石炭酸復(fù)紅 偏堿復(fù)紅酒精飽和溶液 10mL 5%石炭酸 90mL;2、3%硫酸酒精 濃鹽酸 3mL 95%酒精97mL;3、呂氏美蘭液 美蘭酒精飽和狀態(tài)液 30mL 三氯化鐵溶液(1:10000)100mL。